A HPLC se distingue da cromatografia líquida tradicional ("baixa pressão") porque as pressões operacionais são significativamente mais altas (50–350 bar), enquanto a cromatografia líquida comum normalmente depende da força da gravidade para passar a fase móvel através da coluna.
- Qual é a diferença entre cromatografia em coluna e HPLC?
- Por que o HPLC é chamado de cromatografia líquida de alta pressão?
- Para que é usada a cromatografia líquida?
- Quantos tipos de HPLC existem?
- Quais são os detectores usados em HPLC?
- Por que o pH é importante em HPLC?
- É HPLC quantitativo ou qualitativo?
- Qual é o princípio básico de HPLC?
- Quais são os 4 tipos de cromatografia?
- Que líquido é usado para cromatografia?
- Como você lida com instrumentos de HPLC?
Qual é a diferença entre cromatografia em coluna e HPLC?
A cromatografia líquida de alto desempenho é basicamente uma forma altamente aprimorada de cromatografia em coluna. Em vez de permitir que um solvente goteje através de uma coluna sob a gravidade, ele é forçado a passar sob altas pressões de até 400 atmosferas. Isso o torna muito mais rápido.
Por que o HPLC é chamado de cromatografia líquida de alta pressão?
Tamanhos de partículas menores [<10 mícrons] são necessários para melhorar o poder de separação. No entanto, partículas menores têm maior resistência ao fluxo, portanto, pressões mais altas são necessárias para criar a taxa de fluxo de solvente desejada. ... Isso foi chamado de cromatografia líquida de alta pressão ou HPLC.
Para que é usada a cromatografia líquida?
A cromatografia é usada para separar proteínas, ácidos nucléicos ou pequenas moléculas em misturas complexas. A cromatografia líquida (LC) separa as moléculas em uma fase móvel líquida usando uma fase estacionária sólida. A cromatografia líquida pode ser usada para aplicações analíticas ou preparativas.
Quantos tipos de HPLC existem?
As análises de HPLC se enquadram em quatro categorias diferentes: (1) cromatografia de fase reversa, onde a fase estacionária é hidrofóbica (C18-sílica modificada), (2) cromatografia de fase normal em que a fase estacionária é hidrofílica (sílica), (3) cromatografia de interação hidrofílica, um híbrido das técnicas 1 e 2 e (4) íon ...
Quais são os detectores usados em HPLC?
Detectores HPLC
- Detectores UV-Vis. O SPD-20A e o SPD-20AV são detectores UV-Vis de uso geral que oferecem um nível excepcional de sensibilidade e estabilidade. ...
- Detector de índice de refração. ...
- Detectores de fluorescência. ...
- Detector de dispersão de luz evaporativa. ...
- Detector de condutividade.
Por que o pH é importante em HPLC?
Quando as amostras contêm compostos ionizáveis, o pH da fase móvel pode ser uma das variáveis mais importantes no controle da retenção em uma separação por HPLC de fase reversa (RP-HPLC). ... Uma vez que a maioria dos compostos analisados por RP-HPLC contém um ou mais grupos funcionais ácidos ou básicos, a maioria das fases móveis requer controle de pH.
É HPLC quantitativo ou qualitativo?
Para a maioria das análises de HPLC, as áreas de pico são usadas para cálculos quantitativos, embora, na maioria dos casos, resultados equivalentes possam ser obtidos com a altura do pico.
Qual é o princípio básico de HPLC?
O princípio de separação do HPLC é baseado na distribuição do analito (amostra) entre uma fase móvel (eluente) e uma fase estacionária (material de embalagem da coluna). Dependendo da estrutura química do analito, as moléculas são retardadas ao passar pela fase estacionária.
Quais são os 4 tipos de cromatografia?
Existem quatro tipos principais de cromatografia. Estas são cromatografia líquida, cromatografia gasosa, cromatografia em camada fina e cromatografia em papel. A cromatografia líquida é usada no mundo todo para testar amostras de água para procurar poluição em lagos e rios.
Que líquido é usado para cromatografia?
As fases líquidas não polares comuns incluem silicone e vários hidrocarbonetos. Uma alternativa a esse tipo de coluna é usada em HPLC, em que uma fase líquida ligada é usada como fase estacionária. O líquido menos polar é quimicamente ligado ao gel de sílica polar na coluna.
Como você lida com instrumentos de HPLC?
Limpe a seringa com a amostra antes de injetar a amostra no HPLC. Em seguida, injete e carregue a amostra no HPLC, os componentes da amostra serão detectados pelo detector e o tempo é contado. 12. O pico de cada componente será mostrado no monitor nos diferentes tempos de retenção.